荧光和它的特征

  1. 荧光:
    • 荧光产生的物理性质
    • 吸收光谱和发射光谱::实现了红光和绿光的同时释放
    • Extinction coefficient(消光系数) and Quantum yield(量子产率)::X代表荧光强度
    • 光漂白(电子到三线态的过程):
    • 荧光寿命::NADH——自发荧光
    • FRET(荧光共振能量转移)
  2. 荧光的优势:

荧光染料

  1. 荧光分子::DAPI结合双链DNA
    • Application
    • 荧光分子的优劣
    • 应用例子:
      • 标签的应用FIAsH and ReAsH
      • 荧光蛋白的应用
  2. 荧光蛋白
    • 选择荧光蛋白时的注意事项
      • Brightness:
      • pKa:通过pH sensor 可以指示生物过程的变化
      • Maturation:
      • Fusion Toxicity:
      • 遗传编码的光sensor:
    • 荧光蛋白的优劣
    • 光控结构改变的荧光蛋白:发生了吸收光谱的平移
      • Discussion:
  3. 如何标记DNA和RNA(在活细胞成像如何实现)
    1. DNA::存在的缺陷是非重复序列的信噪比会很高
    2. RNA:
  4. Conclusion: